ПОДХОДЫ К ОБНАРУЖЕНИЮ ГЕННО-МОДИФИЦИРОВАННОЙ КУКУРУЗЫ И ПРОВЕДЕНИЮ ПОЛУКОЛИЧЕСТВЕННОГО АНАЛИЗА С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БЕЛКА СР4 EPSPS

Представлены результаты использования различных методов обнаружения генно-модифицированных организмов (ГМО) в пробах пищевых продуктов по уровню белка. В качестве исходного материала использованы семена генно-модифицированной кукурузы NK603 с разным содержанием ГМО, предоставленные Международной ассоциацией оценки семян (International Seed Testing Association - ISTA) в рамках программы оценки качества. Использовали специальные тест-полоски для проведения качественного и иммуноферментнного анализа (ИФА) для полуколичественного определения, где в качестве мишени использовали молекулы СР4 EPSPS белка. Результаты исследований показали, что с использованием тест-полосок можно обнаружить присутствие 0,6% ГМО. Показано, что порог чувствительности тест-полосок обнаруживается при температурной обработке образцов при 80°C. Установленная линейная регрессионная зависимость служит доказательством применимости предлагаемого подхода и использования ИФА для полуколичественного определения ГМО по белку СР4 EPSPS в образцах, содержащих ГМ-кукурузу с концентрацией 0,1%. Отмечаются незначительные отличия при использовании фильтров с разными длинами волн.

gene-modified organisms, maize, protein, test strip, immunofluorescence assay, генно-модифицированные организмы, кукуруза, белок, тест-полоска, ИФА

1. ENGL ad hoc group Overview on the detection, interpretation and reporting on the presence of unauthorized genetically modified materials // JRC Scientific and Technical Report. - 2011.

2. Pöpping B. Methods for the detection of genetically modified organisms: Precision, pitfalls and proficiency // International Laboratory. - 2001. - Vol. 31(4). - P. 23-29.

3. Detection of genetically modified organisms in foods by protein- and DNA-based techniques: bridging the methods / G.J. Van Duijn, R. Van Biert, H. Bleeker-Marcelis [et al.] // J. AOAC Int. - 2002. - Vol. 85(3). - P. 787-791.

4. Генетика / В.Л. Петухов, О.С. Короткевич, С.Ж. Стамбеков [и др.]. - Новосибирск, 2007. - 628 с.

5. International Organization for Standardization (ISO) Foodstuffs Methods of analysis for the detection of genetically modified organisms and derived products protein based methods. EN ISO 21572:2004.

6. International Organization for Standardization (ISO) Foodstuffs Methods of analysis for the detection of genetically modified organisms and derived products general requirements and definitions. EN ISO 24276:2006.

7. Meyer R., Jaccaud Е. Detection of genetically modified soya in processed food products: Prоceedings of the EURO FOOD CHEM IX Conference. - Interlaken. Switzerland. Event, 1997. - N 220. 1. - P. 23-28.

8. Production of certified reference materials for thedetection of GMO / S. Trapmann, H. Schimmel, G.N. Kramer [et al.] // Journal of AOAC International. - 2002. - Vol. 85 (3). - P. 775-779.

9. Mulis K.B., Faloona F.A. Specific synthesis of DNA in vitro via a polymerase catalized chain reaction // Methods in Enzymology. - 1987. - Vol. 155. - P. 335.

10. Detection of cauliflower mosaic virus by the polymerase chain reaction: Testing of food components for false-positive 35S-promoter screening results / C. Wolf, M. Scherzingern, A. Wurz [et al.] // Eur. Food Res. Tech. - 2000. - Vol. 210. - P. 36.

11. Quantitative analysis of genetically modified organisms (GMO) in processed food by PCR based methods / A. Wurz, A. Bluth, P. Zelz [et al.] // Food Control. - 1999. - Vol. 10. - P. 385-389.

12. Huang H.Y., Pan T.M. Detection of genetically modified maize MON810 and NK603 by multiplex and Real-time polymerase chain reaction methods // J. Agric. Food Chem. - 2004. - Vol. 52(11). - P. 3264-3268.

13. Hübner P., Stude E., Lüthy J. Detection of genetically modified organisms in food // Nature Biotech. - 1999. - Vol. 17. - P. 1137-1138.

14. Jensen A. Testing for genetically modified organisms (GMOs): past, present and future perspectives // Biotechnology Advances. - 2009. - Vol. 27. - P. 1071.

15. Detection and traceablitiy of genetically modified organisms in the food production chain / M. Miraglia, K.G. Berdal, C. Brera [et al.] // Food and Chemical Toxicology. - 2004. - Vol. 42. - P. 1157-1180.

16. Stave J.W. Protein immunoassay methods or detection of biotech crops: Applications, limitations, and practical considerations // J. AOAC Int. - 2002. - Vol. 85(3). - P. 780-786.

17. Stave J.W. Detection of new or modified proteins in novel foods derived from GMO - future needs // Food Control. - 1999. - Vol. 10, Issue 6. - P. 367-374.

18. Characterisation of the roundup ready soybean insert / P. Windels, I. Taverniers, A. Depicker [et al.] // Eur. Food Res. Tech. - 2001. - Vol. (213). - P. 107-112.

19. Development of a line specific GMO detection method: A case study / P. Windels, I. Theuns, J. Dendauw [et al.] // Fac. Landbouwkd. Toegepaste Biol. Wet. - 1999. - Vol. 64(5b). - P. 459-462.

20. GMDD: A database of GMO detection methods / D. Wei, Y. Litao, S. Kailin [et al.] // BMC Bioinformatics. - 2008. - Vol. 9. - P. 260.

21. Moens A., Sneyers M. Detection of genetically modified plant products by protein strip testing: an evaluation of real life samples // Eur. Food Res. Technol. - 2007. - Vol. 225. - P. 49.