Preview

Вестник НГАУ (Новосибирский государственный аграрный университет)

Расширенный поиск

ИЗУЧЕНИЕ АНТИГЕННОСТИ БЕЛКОВ БРУЦЕЛЛ В ИММУНОФЕРМЕНТНОМ АНАЛИЗЕ

https://doi.org/10.31677/2072-6724-2019-50-1-92-100

Полный текст:

Аннотация

Прижизненная диагностика бруцеллеза животных основана главным образом на использовании серологических реакций, таких как РА, РБП и/или РСК. В этих тестах антитела определяются с помощью антигена, изготавливаемого из S-клеток бруцелл, главным компонентом которых являются липополисахариды (ЛПС). Последние могут быть причиной перекрестных реакций с другими клинически значимыми грамотрицательными бактериями, что приводит к получению ложноположительных результатов. В этой связи белки внешней мембраны (БВМ) бруцелл находятся в центре внимания исследователей, занимающихся совершенствованием диагностики бруцеллеза. В работе приведены результаты изучения антигенности пяти рекомбинантных белков бруцелл (рБВМ19, рБВМ25, рБВМ31, рВР26 и рСОД) и экстрагируемого белкового антигена (ЭБА) B. abortus и/или B. melitensis в непрямом иммуноферментном анализе (н-ИФА) на сыворотках крови крупного рогатого скота и овец, реагирующих на бруцеллез в классических серологических реакциях. Среди использованных белковых препаратов наиболее антигенным оказался ЭБА, который обнаруживал антитела у 94,8% крупного рогатого скота и 69% овец. Антитела, специфичные к рБВМ19, рБВМ25 и рБВМ31, детектировались лишь у 39; 50,6 и 76,6% серопозитивных коров соответственно. Периплазматические белки – рВР26 и рСОД оказались менее антигенными, чем внешнемембранные, выявляя наличие анти-Brucella антител только у 29,9 и 14,3% крупного рогатого скота соответственно. Рекомбинантные белки не распознавались антителами серопозитивных овец. Антитела к рекомбинантным белкам в н-ИФА обнаруживались у незначительного количества крупного рогатого скота благополучной фермы (от 2,1 до 12,5%). Полученные результаты свидетельствуют о необходимости проведения экспериментального заражения животных с целью объективной оценки потенциала рекомбинантных белков в диагностике бруцеллеза.

Об авторах

А. К. Булашев
Казахский агротехнический университет им. С. Сейфуллина
Казахстан
доктор ветеринарных наук, профессор


А. С. Сыздыкова
Казахский агротехнический университет им. С. Сейфуллина
Казахстан
магистр технических наук


Ж. А. Сураншиев
Казахский агротехнический университет им. С. Сейфуллина
Казахстан
кандидат ветеринарных наук, доцент


К. А. Турсунов
Казахский агротехнический университет им. С. Сейфуллина
Казахстан
магистр ветеринарных наук, ассистент


С. З. Ескендирова
Национальный центр по биотехнологии
Казахстан
кандидат ветеринарных наук, доцент


Список литературы

1. Pappas G. Brucellosis in the world today [Электрон. ресурс] // HCDCP E-bulletin. – Режим доступа: http://www2.keelpno.gr/blog/?p=2033.

2. Диагностическая ценность РИД с разными О-ПС антигенами при бруцеллезе крупного рогатого скота / П.К. Аракелян, Г.В. Разницына, Т.А. Янченко [и др.] // Ветеринария. –2016. –№ 7. – С. 25–30.

3. Humoral immune response against lipopolysaccharide and cytoplasmic proteins of Brucella abortus in cattle vaccinated with B. abortus S19 or experimentally infected with Yersinia enterocolitica serotype O:9 / P.C. Baldi, G.H. Giambartolomei, F.A. Goldbaum [et al.] // Clinical and Diagnostic Laboratory Immunology. – 1996. – Vol. 3. – Р. 472–476.

4. Мониторинг и анализ эпизоотической ситуации по бруцеллезу крупного рогатого скота в Республике Казахстан за 2007–2015 годы / А.Е. Ешмухаметов, К.К. Бейсембаев, Ж.С. Асауова [и др.] // Вестн. Костанай. гос. ун-та им. А. Байтурсунова. – 2016. – № 2. – С. 36–41.

5. Immunogenic proteins of Brucella abortus to minimize cross reactions in brucellosis diagnosis / K.Y. Ko, J.W. Kim, M. Her [et al.] // Veterinary Microbiology. – 2012. – Vol.156. – Р. 374–380.

6. Cloning, Expression and Characterisation of Recombinant Outer Membrane Protein 16 from Brucella spp. / G. Kaur, R. Verna, B.V.S. Kumar [et al.] // Proc. Natl. Acad. – 2015. – Vol. 85. – Р. 853–858.

7. Mohammadi E., Golchin M. Detection of Brucella abortus by immunofluorescence assay using anti outer membrane protein of 19 kDa antibody //Adv Clin Exp Med. – 2018. – Vol. 27. – P. 643–648.

8. Nucleotide sequence and expression of the gene encoding the major 25-kilodalton outer membrane protein of Brucella ovis: Evidence for antigenic shift, compared with other Brucella species, due to a deletion in the gene / A. Cloeckaert, J.M. Verger, M. Grayon [et al.] // Infect. Immun. – 1996. – Vol. 64. – P. 2047–2055.

9. Effective use of recombinant Brucella ovis Omp31 antigen to detect cattle serum antibodies by the ELISA indirect test / M.C. Navarro-Soto, R. Gomez-Flores, A. Morales- Loredo [et al.] // Proceedings of Biotechnology Summit. – Mexico, 2014. – P.139–143.

10. Expression, purification and immunochemical characterization of recombinant OMP28 protein of Brucella species / Y. Manat, A.V. Shustov, E. Evtehova, S.Z. Eskendirova // Open Veterinary Journal. – 2016. – Vol. 6. – P. 71–77.

11. Structural, Functional, and Immunogenic Insights on Cu, Zn Superoxide Dismutase Pathogenic Virulence Factors from Neisseria meningitidis and Brucella abortus / A.J. Pratt, M. DiDonato, D.S. Shin [et al.] //J. Bacteriol. – 2015. – Vol. 197, № 24. – Р. 3834–3847.

12. Tabatabai L.B., Deyoe D.L. Biochemical and biological properties of soluble protein preparations from Brucella abortus // Developments in biological standardization. – 1984. – Vol. 56. – P. 199–211.

13. Получение штамма продуцента рекомбинантного БВМ19 Brucella abortus и изучение его антигенности / А.К. Булашев, К.Т. Турсунов, Ж.К. Каирова [и др.] // Вестн. КазАТУ им. С. Сейфуллина. – 2018. –№ 3. – C. 117–127.

14. Пат. № 30873 РК, МПК C12N 15/52, C12N1/21 Рекомбинантный штамм Escherichia coli BL21 (DE3) /pET22/SOD, продуцирующий Cu/Zn-зависимую супероксиддисмутазу / С.З. Ескендирова, А.В. Шустов, Е.Б. Евтыхова, Е. Манат; заявитель и патентообладатель Национальный центр по биотехнологии РК. –№ 2014/1335.1; заявл. 17.10.2014; опубл. 25.12. 2015, Бюл. № 12. – 5 с.

15. Serological diagnostic potential of recombinant outer membrane proteins (rOMPs) from Brucella melitensis in mouse model using indirect enzyme-linked immunosorbent assay / I. Ahmed, S. Khairani-Bejo, L. Hassan [et al.] // BMC Vet. Res. – 2015. – Vol. 11:275. – DOI: 10.1186/s12917–015–0587–2.


Для цитирования:


Булашев А.К., Сыздыкова А.С., Сураншиев Ж.А., Турсунов К.А., Ескендирова С.З. ИЗУЧЕНИЕ АНТИГЕННОСТИ БЕЛКОВ БРУЦЕЛЛ В ИММУНОФЕРМЕНТНОМ АНАЛИЗЕ. Вестник НГАУ (Новосибирский государственный аграрный университет). 2019;(1):92-100. https://doi.org/10.31677/2072-6724-2019-50-1-92-100

For citation:


Bulashev A.K., Syzdykova A.S., Suranshiyev Z.A., Tursunov K.A., Eskendirova S.Z. ANTIGENICITY OF BRUCELLA PROTEINS BY THE ELISA TEST. Bulletin of NSAU (Novosibirsk State Agrarian University). 2019;(1):92-100. (In Russ.) https://doi.org/10.31677/2072-6724-2019-50-1-92-100

Просмотров: 121


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 2072-6724 (Print)