ПОЛУЧЕНИЕ РЕАГЕНТОВ ДЛЯ СЕРОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ ТОКСОПЛАЗМОЗА

Приведены результаты изучения иммуногенности, антигенности и  специфичности токсоплазмозного антигена, полученного из штамма Тoxoplasma gondii RH (КазНИВИ), а также возможности его использования в  ИФА для серологической диагностики болезни. Для изготовления антигена была использована культура токсоплазмы из суспензии головного мозга, пассажированная через организм мышей. В  ходе исследований был отработан метод, позволяющий эффективно аккумулировать паразитарную массу с низким содержанием экссудативных клеток. В результате проведенной работы определены сроки выживаемости культуры токсоплазмы и сохранения ее вирулентных свойств в процессе хранения. Установлено, что использованный штамм паразита сохраняет свою биологическую активность и вирулентность в течение 17 суток хранения при температуре 4о С. Токсоплазмозный антиген обладал достаточной иммуногенностью и позволил получить гипериммунную овечью сыворотку с титром в ИФА 1: 51200. В разведении 1: 20 препарат давал положительную реакцию в РСК с антисывороткой в титрах 1 : 5 и 1 : 10 и не вступал во взаимодействие с антителами, имеющими специфичность к хламидиям, безноитиям и бруцеллам. Изучение белкового состава токсоплазмозного антигена с помощью электрофореза в  10%-м ПААГ-ДСН показало наличие в  нем мажорного белка с молекулярной массой 140 кДа. Коммерческий реагент Active T. gondi p30 protein fragment (Abcam), представляющий собой белок паразита с молекулярной массой 30 кДа, в равной степени реагировал с гипериммунной токсоплазмозной сывороткой, что свидетельствует об антигенном сходстве сравниваемых препаратов. Авторами сделан вывод о возможности использования токсоплазмозного антигена и гипериммунной антисыворотки в разработке иммуноферментных диагностикумов.

1. Воробьева М. Н. Совершенствование ретроспективной диагностики токсоплазмоза кошек и собак: дис. … канд. вет. наук. – Казань, 2007. – 125 с.

2. Ghazy A. A., Shaapan R. M., Abdel-Rahman E. H. Comparative serological diagnosis of toxoplasmosis in horses using locally isolated Toxoplasma gondii // Veterinary Parasitology. – 2007. – Vol. 14, N 1–2. – P. 31–36.

3. Evaluation of the usefulness of six commercial agglutination assays for serologic diagnosis of toxoplasmosis / O. Villard, B. Cimon, J. Franck [et al.] // Diagnostic Microbiology and Infectious Disease. – 2012. – Vol. 73, N 3. – P. 231–235.

4. Evaluation of a commercial ELISA kit for detection of antibodies against Toxoplasma gondii in serum, plasma and meat juice from experimentally and naturally infected sheep / R. Edelhofer, F. Grimm, P. Deplazes, W. Basso // Parasit. Vectors. – 2013. – Vol. 5, N 6. – P. 85. – doi: 10.1186/1756–3305–6–85.

5. Assessment of diagnostic accuracy of a commercial ELISA for the detection of Toxoplasma gondii infection in pigs compared with IFAT, TgSAG1-ELISA and Western blot, using a Bayesian latent class approach / W. Basso, S. Hartnack, L. Pardini [et al.] // Int. J. Parasitol. – 2013. – Vol. 43, N 7. – P. 565–570.

6. Al-Adhami B.H., Gajadhar A. A. A new multi-host species indirect ELISA using protein A/G conjugate for detection of anti-Toxoplasma gondii IgG antibodies with comparison to ELISA-IgG, agglutination assay and Western blot // Vet. Parasitol. – 2014. – Vol. 200, N 1–2. – Р. 66–73.

7. Торгаева А. Т., Ильгекбаева Г. Д. Предварительный патент РК № 12343. Способ получения токсо-плазменного антигена для серологической диагностики; опубл. 17.12.2002, Бюл. № 12. – 4 с.

8. Халилаев А. Н. Способы получения иммунных сывороток для изучения антигенов токсоплазм и безноитий: автореф. дис. … канд. биол. наук. – М., 1982. – 15 с.

9. Омаров Ж. К., Боровиков А. А., Красов Б. М. Способ получения токсоплазменного антигена: опи-сание изобретения к авторскому свидетельству № 533376; заявл. 31.08.1973; опубл. 30.10.1976, Бюл. № 40. – 4 с.