Испытание экспериментальных бруцеллезных антигенов в стимулированном клеточном тесте с нитросиним тетразолием

Представлены результаты испытания экспериментальных образцов бруцеллезных антигенов в качестве активатора при постановке стимулированного клеточного теста с нитросиним тетразолием in vitro. В лабораторных условиях изготовлены экспериментальные образцы бруцеллезных препаратов из штаммов бруцелл с разной антигенной структурой. Экспериментальные исследования проведены на иммунизированных R-штаммом бруцелл морских свинках. Определены активность и специфичность исследуемых образцов, а также оптимальная концентрация, обладающая достаточным активирующим потенциалом на нейтрофилы крови иммунизированных морских свинок. На первом этапе исследований отмечено, что дезинтеграты бруцелл и корпускулярные антигены в концентрациях соответственно 50 и 100 мкг/мл обеспечивали специфичность реакции и не вызывали неспецифической активации нейтрофильных гранулоцитов в НСТ-тесте с кровью интактных животных. В дальнейшем была изучена динамика иммунного ответа иммунизированных морских свинок в НСТ-тесте с применением экспериментальных образцов бруцеллезных антигенов в оптимальных концентрациях. Отбор биоматериала для исследований осуществляли до иммунизации и на 7-, 14-, 21-, 28-, 42-, 55-, 69, 125-е сутки после иммунизации. Рассчитан коэффициент стимуляции как отношение индуцированного уровня клеточной активности к спонтанному. Установлено, что максимальный уровень специфической активации нейтрофилов в НСТтесте отмечается преимущественно на 28-е сутки, что совпадает с пиком синтеза агглютинирующих и комплементсвязывающих антител в серологических реакциях. Полученные в результате эксперимента данные позволяют сделать вывод о возможности применения экспериментальных образцов бруцеллезных антигенов в качестве стимулятора при постановке НСТ-теста с целью проведения достоверного контроля клеточной перестройки организма в период формирования иммунного ответа.

1. Обзор эпидемиологической и эпизоотологической ситуации по бруцеллезу в мире в 2022 году и прогноз на 2023 год в Российской Федерации / Россельхознадзор [Электронный ресурс]. – URL: https://fsvps.gov.ru/ru/fsvps/news/212515.html (дата обращения: 30.05.2023).

2. The Development of Diagnostic and Vaccine Strategies for Early Detection and Control of Human Brucellosis, Particularly in Endemic Areas / A. Elbehiry [et al.] // Vaccines. – 2023. – N 11. – P. 1–20.

3. Diagnostic significance of hematological parameters in brucellosis / M. Çelik [et al.] // Journal of Clinical Medicine of Kazakhstan. – 2023. – N 1. – Р. 50–55.

4. Ecological bases of the epizootic process of brucellosis and its control in small ruminants / P.K. Arakelyan, A.S. Dimova, S.K. Dimov [et al.] // IOP Conference Series: Earth and Environmental Science. «Ensuring sustainable development in the contextof agriculture, green energy, ecology and earth science». – 2021. – P. 1–7. – Scopus ID 45703365, DOI:10.1088/1755–1315/723/4/042015

5. Dendritic cells and Brucella spp. interaction: the sentinel host and the stealthy pathogen. / E.D. Avila– Calder´on [et al.] // Folia Microbiologica. – 2020. – N 65. – P. 1–16.

6. Значение клеточных факторов иммунитета при применении экологически безопасной сплитконъюгированной противобруцеллёзной вакцины в сочетании с иммуномодуляторами / Д. Абдессемед, В.А. Агольцов, С. Ю. Веселовский [и др.] // Теоретическая и прикладная экология. – 2020. – № 2. – С. 172–179.

7. Immunological response to Brucella abortus strain 19 vaccination of cattle in a communal area in South Africa / G.J.G. Simpson, T. Marcotty, E. Rouille [et al.] // Journal of the South African Veterinary Association. – 2018. – N 89 (0). – a1527. – https://doi. org/10.4102/jsava.v89i0.1527.

8. Манакова О.О. Изучение клеточного иммунного ответа при бруцеллезе животных // Современные научные подходы к решению проблемы бруцеллеза: cб. материалов конф., Омск, 11 октября 2020 г. – Омск: ИП Машкеевой Е.А., 2020. – С. 68–72.

9. Immune response and recent advances in diagnosis and control of brucellosis / A. Elrashedy [et al.] // German Journal of Veterinary Research. – 2022. – N 2 (1). – P. 10–24.

10. Сабанчиева Ж.Х. Состояние фагоцитарной системы крови в НСТ–тесте у больных ВИЧ–инфекцией // Успехи современного естествознания. – 2006. – № 3. – С. 44–45.

11. Дегтяренко Л.В., Власенко В.С., Бронников В.С. Оценка механизмов иммуногенеза у морских свинок, сенсибилизированных бруцеллами // Вестник ветеринарии. – 2015. – № 2 (73). – С. 42–46.

12. Власенко В.С., Дегтяренко Л.В., Иванов А.И. Оценка функциональной активности нейтрофилов крови морских свинок, инфицированных R–формой бруцелл // Теоретические и практические аспекты развития современной ветеринарной науки: Тр. КазНИВИ. – 2012. – Т. 58. – С. 67–72.

13. Кошкин И.Н., Власенко В.С., Бажин М.А. Функциональная активность нейтрофилов у морских свинок, иммунизированных конъюгатами на основе антигенов БЦЖ с бетулином и его производными // Вестник КрасГАУ. – 2021. – № 5(170). – С. 116–121.

14. Алимов А.М., Закирова Л.А. Показатели клеточного иммунитета у морских свинок при вакцинации и экспериментальной бруцелезной инфекции // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. – 2016. – Т. 227, № 3. – С. 4–6.

15. Методы иммунологической оценки животных, сенсибилизированных измененными формами бруцелл: метод. пособие / Л.В. Дегтяренко, Л.Н. Гордиенко, В.С. Власенко [и др.]. – М.; Омск: Литера, 2017. – 30 с.