vestngauВестник университета биотехнологийVestnik University of biotechnologiy3033-8433Publishing Centre “Zolotoy Kolos” of Novosibirsk State Agrarian Universityvestngau-707Research ArticleВЕТЕРИНАРИЯVETERINARY SCIENCESРАЗРАБОТКА ИММУНОЛОГИЧЕСКОГО МЕТОДА ДИАГНОСТИКИ ЭХИНОКОККОЗА СОБАКDEVELOPMENT OF IMMUNOTECHNIQUE USED FOR DIAGNOSTICS OF DOG ECHINOCOCCUS DISEASEБулашевА. К.noemail@neicon.ruАкибековО. С.noemail@neicon.ruМухитденГ. .noemail@neicon.ruСериковаШ. .noemail@neicon.ruТокпанС. С.noemail@neicon.ruКазахский агротехнический университет им.С.СейфуллинаRussian FederationНаучно-исследовательский институт сельскохозяйственной биотехнологииRussian Federation20171605201701130138Copyright © Булашев А.К., Акибеков О.С., Мухитден Г..., Серикова Ш..., Токпан С.С., 20172017Булашев А.К., Акибеков О.С., Мухитден Г..., Серикова Ш..., Токпан С.С.Булашев А.К., Акибеков О.С., Мухитден Г..., Серикова Ш..., Токпан С.С.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://vestngau.elpub.ru/jour/article/view/707

Эхинококкоз стал высокоэндемичным зоонозным заболеванием в бывших советских республиках Средней Азии, в том числе в Казахстане, из-за увеличения практики домашнего забоя скота и несоблюдения периодической обязательной дегельминтизации собак. В этой связи особую актуальность приобретают своевременное выявление собак, зараженных возбудителем болезни - Еchinococcus granulosus, а также мониторинг окружающей среды на предмет присутствия паразита. Известные методы прижизненной диагностики эхинококкоза у дефинитивных хозяев остаются малоэффективными. В настоящей работе приведены результаты исследований по разработке ИФА-теста для выявления собак, инвазированных эхинококками, на основе обнаружения антигена цестоды в образцах фекалий. Основными реагентами тест-системы являются кроличьи поликлональные и мышиные моноклональные антитела, имеющие специфичность к экскреторно-секреторному антигену личиночных и взрослых форм Е. granulosus. Испытание диагностикума на образцах фекалий экспериментально зараженных собак показало, что он позволяет дифференцировать копроантигены двух близкородственных цестод: Е. granulosus и T. hydatigena. Копроантиген эхинококка обнаруживался в стуле собак на 5-й день после заражения и детектировался до 30-го дня эксперимента (время наблюдения). Результаты исследований свидетельствуют о возможности использования ИФА-теста для прижизненной диагностики эхинококкоза собак. По мнению авторов, для внедрения ИФА-теста в диагностику эхинококкоза необходимо установить продолжительность элиминации копроантигена после дегельминтизации, что позволит определить сроки повторного исследования собак с целью подтверждения освобождения организма от паразита.

Echinococcus has become high endemic zoonotic disease in the former Soviet republics of Central Asia, i.e. Kazakhstan, due to higher slaughter and dehelminthization of dogs. Due to this fact, early recognition of dogs infected by Еchinococcus granulosus and environmental monitoring on parasites are very relevant and important. Certain methods of echinococcus diagnostics are inefficient. The paper reveals the results on development of immune and enzyme test for recognition of the dogs infected by echinococcus on the basis of finding the gid tapeworm antigene in excrements. The main agents of test system are rabbit polyclonal antibodies and mice monoclonal antibodies that are specific to excretory and secretory antigene of larvae and adult forms of Е. granulosus. The authors did experiment on the excrements of experimentally infected dogs and diagnostic agent has shown that it differentiates coproantigenes of two closely related gid tapeworms: Е. granulosus and T. hydatigena. Coproantigene of echinococcus was observed in the dogs excrements on the 5th days after being infected and was detected till the 30th day of the experiment. The research results speak about the possibility to use immune and enzyme analysis for diagnostics of echinococcus. The authors suggest to introduce immune and enzyme test into echinococcus diagnostics and set the coproantigene elimination after dehelminthization that can define the period of re-examination in order to confirm no parasites in the organism.

dog echinococcusEchinococcus granulosusdiagnosticsimmune and enzyme analysisexcretory and secretory antigenepolyclonal antibodymonoclonal antibodyэхинококкоз собакEchinococcus granulosusдиагностикаиммуноферментный анализэкскреторно-секреторный антигенполиклональные антителамоноклональные антителаReferencesShaikenov B. Sh., Torgerson P. R. Changes in the epidemiology of echinococcosis in Kazakhstan // Echinococcosis in Central Asia: Problems and Solutions / Edited by P. Torgerson and B. Shaikenov. - Zurich; Almaty: Publishing house «Dauir», 2004. - P. 3-12.Shaikenov B. Sh., Torgerson P. R. Changes in the epidemiology of echinococcosis in Kazakhstan // Echinococcosis in Central Asia: Problems and Solutions / Edited by P. Torgerson and B. Shaikenov. - Zurich; Almaty: Publishing house «Dauir», 2004. - P. 3-12.Mathis A., Deplazes P. Diagnosis of Echinococcus granulosus and E. multilocularis in animals and identification in environmental samples // Ibid. - P. 149-158.Mathis A., Deplazes P. Diagnosis of Echinococcus granulosus and E. multilocularis in animals and identification in environmental samples // Ibid. - P. 149-158.Production and characterization of monoclonal antibodies against excretory/secretory products of adult Echinococcus granulosus, and their application to coproantigen detection / C. Casaravilla, R. Malgor, A. Rossi [et al.] // Parasitol. Int. - 2005. - Vol. 54. - P. 43-49.Production and characterization of monoclonal antibodies against excretory/secretory products of adult Echinococcus granulosus, and their application to coproantigen detection / C. Casaravilla, R. Malgor, A. Rossi [et al.] // Parasitol. Int. - 2005. - Vol. 54. - P. 43-49.Coproantigens detection for the diagnosis of canine Echinococcosis in the border area of La Quiaca-Villazón / N. Casas, S. Costas Otero, G. Céspedes [et al.] // Rev. Argent. Microbiol. - 2013. - Vol. 45, N 3. - P. 154-159.Coproantigens detection for the diagnosis of canine Echinococcosis in the border area of La Quiaca-Villazón / N. Casas, S. Costas Otero, G. Céspedes [et al.] // Rev. Argent. Microbiol. - 2013. - Vol. 45, N 3. - P. 154-159.Kuru B. B., Aypak S., Aysul N. Prevalence of Echinococcus granulosus determined with polymerase chain reaction in dogs in Aydın district // Turkiye Parazitol. Derg. - 2013. - Vol. 37, N 2. - P. 78-83.Kuru B. B., Aypak S., Aysul N. Prevalence of Echinococcus granulosus determined with polymerase chain reaction in dogs in Aydın district // Turkiye Parazitol. Derg. - 2013. - Vol. 37, N 2. - P. 78-83.A comparison of loop-mediated isothermal amplification (LAMP) with other surveillance tools for Echinococcus granulosus diagnosis in canine definitive hosts / X. W. Ni, D.P. McManus, Z. Z. Lou [et al.] // PLoS One. 2014. Jul 9;9 (7): e100877. doi: 10.1371 / journal.pone.0100877. e Collection 2014.A comparison of loop-mediated isothermal amplification (LAMP) with other surveillance tools for Echinococcus granulosus diagnosis in canine definitive hosts / X. W. Ni, D.P. McManus, Z. Z. Lou [et al.] // PLoS One. 2014. Jul 9;9 (7): e100877. doi: 10.1371 / journal.pone.0100877. e Collection 2014.Monoclonal Antibody-Based Copro-ELISA Kit for Canine Echinococcosis to Support the PAHO Effort for Hydatid Disease Control in South America / N. Morel, G. Lassabe, S. Elola [et al.] // PLoS Negl Trop Dis. 2013;7 (1): e 1967. doi: 10.1371 / journal. pntd.0001967. Epub 2013 Jan 10.Monoclonal Antibody-Based Copro-ELISA Kit for Canine Echinococcosis to Support the PAHO Effort for Hydatid Disease Control in South America / N. Morel, G. Lassabe, S. Elola [et al.] // PLoS Negl Trop Dis. 2013;7 (1): e 1967. doi: 10.1371 / journal. pntd.0001967. Epub 2013 Jan 10.Easy and Efficient Method for Native and Immunoreactive Echinococcus granulosus Antigen 5 Enrichment from Hydatid Cyst Fluid / D. Pagnozzi, G. Biosa, M. F. Addis [et al.] // PLoS One.2014 Aug 13;9 (8): e104962. doi: 10.1371/journal.pone.0104962. eCollection 2014.Easy and Efficient Method for Native and Immunoreactive Echinococcus granulosus Antigen 5 Enrichment from Hydatid Cyst Fluid / D. Pagnozzi, G. Biosa, M. F. Addis [et al.] // PLoS One.2014 Aug 13;9 (8): e104962. doi: 10.1371/journal.pone.0104962. eCollection 2014.Characterization of excretory-secretory products from protoscoleces of Echinococcus granulosus and evaluation of their potential for immunodiagnosis of human cystic echinococcosis / D. Carmena, J. Martínez, A. Benito, J. A. Guisantes // Parasitology. - 2004. - Vol. 129, N 3. - Р. 371-388.Characterization of excretory-secretory products from protoscoleces of Echinococcus granulosus and evaluation of their potential for immunodiagnosis of human cystic echinococcosis / D. Carmena, J. Martínez, A. Benito, J. A. Guisantes // Parasitology. - 2004. - Vol. 129, N 3. - Р. 371-388.Копро-ИФА для диагностики эхинококкоза собак: отчет о НИР (промежуточный) / АО «Казахский агротехнический университет им. С. Сейфуллина»: рук. А. К. Булашев; исполн. О. С. Акибеков. - Астана, 2015. - 62 с. - № ГР 0: 0115РК00470. - Инв. № 0215РК02092.Копро-ИФА для диагностики эхинококкоза собак: отчет о НИР (промежуточный) / АО «Казахский агротехнический университет им. С. Сейфуллина»: рук. А. К. Булашев; исполн. О. С. Акибеков. - Астана, 2015. - 62 с. - № ГР 0: 0115РК00470. - Инв. № 0215РК02092.Bulashev A., Akibekov O., Abulgazimova G. Development and Evaiuation of ELISA for Diagnosis of Cystic Echinococcosis // Proceedings of Seoul International Conference on Biological Engineering & Natural Science. - Seoul, South Korea, 27-29 June 2015. - Seoul, 2015. - P. 318-319.Bulashev A., Akibekov O., Abulgazimova G. Development and Evaiuation of ELISA for Diagnosis of Cystic Echinococcosis // Proceedings of Seoul International Conference on Biological Engineering & Natural Science. - Seoul, South Korea, 27-29 June 2015. - Seoul, 2015. - P. 318-319.Smyth J.D, Davies Z. In vitro culture of the strobilar state of Echinococcus granulosus (sheep strain): a review of basic problems and results // Int. J. Parasitol. - 1974. - Vol. 4. - Р. 631-644.Smyth J.D, Davies Z. In vitro culture of the strobilar state of Echinococcus granulosus (sheep strain): a review of basic problems and results // Int. J. Parasitol. - 1974. - Vol. 4. - Р. 631-644.Howel M. J. Cultivation of Echinococcus species in vitro // RCA Thompson, The Biology of Echinococcus and Hydatid Disease. - London: George Allen & Unwin, 1986. - P. 143-163.Howel M. J. Cultivation of Echinococcus species in vitro // RCA Thompson, The Biology of Echinococcus and Hydatid Disease. - London: George Allen & Unwin, 1986. - P. 143-163.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.